GB 31645—2018
食品安全国家标准
胶原蛋白肽
1范围
本标准适用于食品加工用途的胶原蛋白肽产品。
2 术语和定义
2.1 胶原蛋安肽
以富含胶原蛋白的新鲜动物组织（包括皮、骨、筋、腱、鳞等）为原料，经过提取、水解、精制生产的，相对分子质量低于10000的产品。
3技术要求
3.1 原料要求
3.1.1 可以使用的原料：
a）屠宰场、肉联厂、罐头厂、菜市场等提供的经检疫合格的新鲜牛、猪、羊和鱼等动物的皮、骨、筋、K s t & b C腱和
鳞等；
b）制革鞣制工艺前，q K = M Y t s V剪切下的带毛+ k 1 R . m边皮或剖下的内层皮；
c）骨粒加工厂加工的清洁骨粒和自然风干的骨料；
d）可食水生动Y : = % 6 p M o物鱼鳔、可食棘皮C t :动物、Y 3 r n I ^ ^ Y !水母等。
3.1.2 禁止使用的原料：
a）制革厂鞣制后的任何废料；
b）无检验检疫合格证明的牛、猪、羊或鱼等动物的* O Y 8皮h 0 _ V . y x H 2、骨、筋、腱和鳞等；
c）经有害物处理过或使用苯等有机溶剂进行脱脂的动物的皮、骨、j S 6 X a筋、腱和鳞等。
3.2 感官要求
感官要求应符合表1的规定。
| 表1 感官要求 | ||
| 项目 | 要求 | 检验方法 |
| 色泽 | 白色或淡黄色 |
取2g试样置于洁净的烧杯中，用200mL温开水配制成1%溶液，在自然光下观察色泽和有无沉淀。闻其气味，用温开水漱口，品其滋味 |
| 滋味、气味 | 具有产品应有的滋味和气味，无异味 | |
| 状态 | 粉末状或颗粒状，无结块，无正常视力可见的外来异物 | |
3.3 理化指标
理化指标应符合表2的规定。
| 表2 理化指标 | ||
| 项目 | 指标I B + s F ? ~ t | 检验方法 |
| 相对分子质量小0 b Q u q C于10000的胶原蛋白肽所占比例/% ≥ | 90.0 | 附录A |
| 羟脯氨酸（以干基计）/（g/1d / 800g） ≥ | 3.0 | G\ – n + kB/T9695.23 |
| 总氮（以干基计）/（g/100g） ≥ | 15.0 | GB 5009.5 |
| 灰分/（g/100g） ≤ | 7.0 | GB 5009.4 |
| 水分/（g/100g） ≤ | 7.0 |
GB 5009.3第一法 |
3.4 污染物限量
污染物限量应符合表3的规定。
| 表3 污染物限量 | ||
| 项目 | 限量 | 检验方法 |
| 铅（以Pb计）/（mg/kg） | 1.0 | GB 5009.12 |
| 镉（以Cd计）/（mg/kg）o \ \ | 0.1 | GB 5009.15 |
| 总砷（以As计C E 3 f u o `）/（` _ G = 6 4 i emg/kg） | 1| { W 3 h o @ T.0 | GB 5009.11 |
| 铬（以Cr计）/（mg/kg） | 2.0 | GB 5009.123 |
| 总汞（以Hg计）/（mg/kg） | 0.1 | GB 5009.17 |
3.5 微生物限量
微生物限量应符合表4q @ M | N的规定。
| 表4 微生物限量 | |||||
| 项目 | 采样方案a及限量 | 检验方法 | |||
| n | c | m | M | ||
| 菌落总数/（CFU/g） | 5 | 2 | 104 | 105 | GB 4789.2a ) y z c p 5 |
| 大肠菌群/（CFU/g） | 5 | 2 | 10 | 102 | GB 4789.3 |
| a样品的采样及处理按GB 4789.1执h h X行。 | |||||
3.6 食品工业用加工助剂
食品工业用u 1 l O加工助剂的使用应符合GB 2760的规定。
附录A
相对分子质量小于10000的胶原蛋白肽所占比例的检测方法
（高效体积排| H r m R T阻色谱法）
A.1 方法提要
采用高效体积排阻H L | x _ J B m色谱法测定。即以多孔性填料为固定相，依据样品组分分子体积大小的差别进行分离，在肽键的紫外吸收波长220nm条件下检测，使用相对分子质量分布测定的专用数据处理软件（即GPC软件），对标准品和样品的色谱图及其数据进行处理，根据相对分子质量校正曲线方程，计算得到胶原蛋白肽的相对分子质量大小及分布范围。
A.2 试剂
A.2.1 乙腈：色谱纯。
A.2.2 三氟乙酸：分析纯。
A.2.3 水：GB/T 6682规定的一级水。
A.2N J n N Q ..4 相对分子质量校正曲线所用标准品：
a）细胞色素C（cytochromeC，MW12384）；
b）抑肽酶（aprotinin，MW6512）；
c）杆菌酶（bacitracin，MW1423）；
d）乙氨酸-乙氨酸-酪氨酸-精氨酸（MW451）；
e）乙氨酸-乙氨酸-乙氨酸（MW189）。
A.3 仪器和设备
A.3.1 高效液A P g e ; u I n T相色谱仪j ) [ 1 0 ] * \：配有紫外检测器和含有GPC数据处理! z \ D ?软件的色谱工作站。
A.3.2 流动相真空抽滤脱气装置。
A.3.3 超声波振荡器。
A.3.4 分析天平：感量0.0001g。
A.4 色谱条件与系统适应性实验
A.4.1 色谱柱：TSKgel G2000 SWXL 300mm×7.8mm（GEL LOT 502R）或性能与此相近的同类^ M i型其他适用于测定肽的分子量分布的凝胶柱。G R S L _
A.4.2 流动相：乙腈：水：三氟乙酸，体积比为40：60：0.05。
A.4.3 检测p V /波长：220nm。
A.4.4 流速：0.5mL/min。
A.4? F y M * M \ . k.5 柱温：30℃f t o 2 9 O。
A.4.6 进样体积：10µL。
A.4.7 为使色谱系统符合检测要求，规定在上述色谱条件下，凝胶色谱柱的柱效即理论塔板数（N）按三肽标准品（乙氨酸-乙氨酸-乙氨酸）峰计算不低于5000，蛋白肽的分配系数（Kd）应在0~1之间。
A.5 相对分子质量校正曲线制作
分别用流动相配制b 4 \ d ~ ;成浓度为1.0g/L左右的上述不同相对分子质量的肽标准品溶液，用孔径l h W t l G 8 h为0.2μm~0.5μm聚四氟乙烯或尼龙过滤膜过滤后分别进样，得到/ [ : Y H p e C系列标准品的色谱图。以相对分子质量的对数（lgMW）对保留时间作图或作线性回归得到相对分子质量校正曲线及其方程– F c + 3 $ 5。
A.6 样品制备
用! A ; K称量纸称取样N G d i L t F }品125.0mg左右，转移至25mL容量瓶中，用流动相定容至+ Q L b \ 0刻度，超声振荡10min，使样品充分溶解混匀，用孔径为0.2μm~0.5μm聚四氟乙烯或尼龙过滤膜过滤，其滤液用于测定。
A.7 相对分子质量的计算
将A.6制备的样品溶液在A.4色谱条件v 5 g下进样分析，然后使用GPC数据处理软件，根据相对分子质量校正曲线方程对样品的色谱图及其数据进行计U a @ J 0 ! ` i算处理，即可得到样品中胶原蛋白肽的相对分子质量大小及分布范围。用峰面积归一化法计算相对分子质量小于10000的胶原蛋白肽t Y d的相对百分比之和。
法规, 国家标准
